ਫਲੂਮੇਕੁਇਨ ਦੇ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਲਈ ਪ੍ਰਤੀਯੋਗੀ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਇਮਯੂਨੋਸੈਸ ਕਿੱਟ
ਟੈਸਟ ਦਾ ਸਿਧਾਂਤ
ਇਹ ਕਿੱਟ ਅਸਿੱਧੇ-ਮੁਕਾਬਲੇ ਵਾਲੀ ELISA ਤਕਨਾਲੋਜੀ 'ਤੇ ਆਧਾਰਿਤ ਹੈ।ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਾਈਟਰ ਖੂਹ ਕਪਲਿੰਗ ਐਂਟੀਜੇਨ ਨਾਲ ਲੇਪ ਕੀਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।ਫਲੂਕੁਇਨਨਮੂਨੇ ਵਿਚ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਲਈ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਾਈਟਰ ਪਲੇਟ 'ਤੇ ਐਂਟੀਜੇਨ ਕੋਟੇਡ ਨਾਲ ਮੁਕਾਬਲਾ ਕਰਦੀ ਹੈ।ਐਂਟੀ-ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਲੇਬਲ ਵਾਲੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਦੇ ਜੋੜ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਰੰਗ ਦਿਖਾਉਣ ਲਈ ਟੀਐਮਬੀ ਸਬਸਟਰੇਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਸਮਾਈ ਇਸ ਵਿੱਚ ਮੌਜੂਦ ਟੈਟਰਾਸਾਈਕਲੀਨ ਨਾਲ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸੰਬੰਧਿਤ ਹੈ, ਸਟੈਂਡਰਡ ਕਰਵ ਨਾਲ ਤੁਲਨਾ ਕਰਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਪਤਲੇ ਮਲਟੀਪਲ ਦੁਆਰਾ ਗੁਣਾ ਕਰਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚ ਫਲੂਮਕੁਇਨ ਦੀ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਦੀ ਗਣਨਾ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨਾਂ
ਇਸ ਕਿੱਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਸ਼ਹਿਦ ਵਿੱਚ ਫਲੂਕੁਇਨ ਦੀ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ਦੇ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਅਤੇ ਗੁਣਾਤਮਕ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਵਿੱਚ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਅੰਤਰ-ਪ੍ਰਤੀਕਰਮ
ਫਲੂਕੁਇਨ ……………………………………………… 100%
ਸਮੱਗਰੀ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ
ਉਪਕਰਨ
┅┅ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਾਈਟਰ ਪਲੇਟ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਫੋਟੋਮੀਟਰ (450nm/630nm)
┅┅ਹੋਮੋਜਨਾਈਜ਼ਰ ਜਾਂ ਪੇਟ ਕਰਨ ਵਾਲਾ
┅┅ਸ਼ੇਕਰ
┅┅Vortex ਮਿਕਸਰ
┅┅Centrifuge
┅┅ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਕ ਸੰਤੁਲਨ (ਇੰਡਕਟੈਂਸ: 0.01 ਗ੍ਰਾਮ)
┅┅ਗ੍ਰੈਜੂਏਟਿਡ ਪਾਈਪੇਟ: 15 ਮਿ.ਲੀ
┅┅ਰਬੜ ਪਾਈਪੇਟ ਬਲਬ
┅┅ਪੋਲੀਸਟੀਰੀਨ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਟਿਊਬ: 15 ਮਿ.ਲੀ., 50 ਮਿ.ਲੀ.
┅┅ਗਲਾਸ ਟੈਸਟ ਟਿਊਬ: 10 ਮਿ.ਲੀ
┅┅ਮਾਈਕ੍ਰੋਪਿਪੇਟਸ: 20ml-200ml, 100ml -10000ml,
250 ਮਿਲੀਲੀਟਰ - ਮਲਟੀਪਿਪੇਟ
ਰੀਐਜੈਂਟਸ
┅┅n-ਹੈਕਸੇਨ(AR)
┅┅ਮਿਥਾਈਲੀਨ ਕਲੋਰਾਈਡ (AR)
┅┅Acetonitrile (AR)
┅┅ਡੀਓਨਾਈਜ਼ਡ ਪਾਣੀ
-----ਕੇਂਦਰਿਤ ਹਾਈਡ੍ਰੋਕਲੋਰਿਕ ਐਸਿਡ (AR)
ਕਿੱਟ ਦੇ ਹਿੱਸੇ
● ਐਂਟੀਜੇਨ ਦੇ ਨਾਲ ਕੋਟੇਡ 96 ਖੂਹਾਂ ਵਾਲੀ ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਾਈਟਰ ਪਲੇਟ
● ਮਿਆਰੀ ਹੱਲ (6 ਬੋਤਲਾਂ × 1 ਮਿ.ਲੀ./ਬੋਤਲ)
0ppb, 0.3ppb, 1.2ppb, 4.8ppb, 19.2ppb, 76.8ppb
● ਉੱਚ ਇਕਾਗਰਤਾ ਮਿਆਰੀ ਨਿਯੰਤਰਣ:(1ml/ਬੋਤਲ)
………………………………………………………100ppb
● ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਕਨਜੁਗੇਟ 12 ਮਿ.ਲੀ.………………………... ਲਾਲ ਕੈਪ
● ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਘੋਲ 7 ਮਿ.ਲੀ.…………………………………..ਗ੍ਰੀਨ ਕੈਪ
● ਘੋਲ A 7 ਮਿ.ਲੀ.……………………………………….. ਸਫੈਦ ਕੈਪ
● ਘੋਲ B 7ml ……………………………………… ਲਾਲ ਕੈਪ
● ਸਟਾਪ ਘੋਲ 7ml ……………………..……… ਪੀਲੀ ਕੈਪ
● 20Xਕੇਂਦਰਿਤ ਧੋਣ ਦਾ ਹੱਲ 40 ਮਿ.ਲੀ
…………………………………………..ਪਾਰਦਰਸ਼ੀ ਕੈਪ
●2X ਐਕਸਟਰੈਕਸ਼ਨ ਘੋਲ 50 ਮਿ.ਲੀ.……………………… ਨੀਲੀ ਕੈਪ
Reagents ਦੀ ਤਿਆਰੀ
7.1 ਸ਼ਹਿਦ ਦਾ ਨਮੂਨਾ
ਹੱਲ 1 : 0.2 ਐਮ ਹਾਈਡ੍ਰੋਕਲੋਰਿਕ ਐਸਿਡ ਘੋਲ
ਵਜ਼ਨ 41.5 ਮਿਲੀਲੀਟਰ ਸੰਘਣਾ ਹਾਈਡ੍ਰੋਕਲੋਰਿਕ ਐਸਿਡ, ਡੀਓਨਾਈਜ਼ਡ ਪਾਣੀ ਨਾਲ 500 ਮਿ.ਲੀ. ਤੱਕ ਪਤਲਾ ਕਰੋ।
ਹੱਲ 2: ਘੋਲ ਧੋਵੋ
ਸੰਘਣੇ ਧੋਣ ਵਾਲੇ ਘੋਲ ਨੂੰ ਡੀਓਨਾਈਜ਼ਡ ਪਾਣੀ ਨਾਲ 1:19 ਦੇ ਆਇਤਨ ਅਨੁਪਾਤ ਵਿੱਚ ਪਤਲਾ ਕਰੋ, ਜਿਸਦੀ ਵਰਤੋਂ ਪਲੇਟਾਂ ਨੂੰ ਧੋਣ ਲਈ ਕੀਤੀ ਜਾਵੇਗੀ।ਪਤਲੇ ਘੋਲ ਨੂੰ 1 ਮਹੀਨੇ ਲਈ 4℃ 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਦਾ ਹੱਲ3: ਕੱਢਣ ਦਾ ਹੱਲ
1:1 (ਜਾਂ ਲੋੜ 'ਤੇ ਨਿਰਭਰ) ਦੇ ਵਾਲੀਅਮ ਰਾਸ਼ਨ ਵਿੱਚ ਡੀਓਨਾਈਜ਼ਡ ਪਾਣੀ ਨਾਲ 2×ਕੇਂਦਰਿਤ ਐਕਸਟਰੈਕਸ਼ਨ ਘੋਲ ਨੂੰ ਪਤਲਾ ਕਰੋ, ਜੋ ਨਮੂਨਾ ਕੱਢਣ ਲਈ ਵਰਤਿਆ ਜਾਵੇਗਾ।ਇਸ ਪਤਲੇ ਘੋਲ ਨੂੰ 4℃ 'ਤੇ 1 ਮਹੀਨੇ ਲਈ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਨਮੂਨਾ ਤਿਆਰੀਆਂ
8.1 ਓਪਰੇਸ਼ਨ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਉਪਭੋਗਤਾਵਾਂ ਲਈ ਨੋਟਿਸ ਅਤੇ ਸਾਵਧਾਨੀਆਂ
(a) ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਪ੍ਰਯੋਗ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਵਿੱਚ ਇੱਕ-ਬੰਦ ਸੁਝਾਅ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ, ਅਤੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਰੀਐਜੈਂਟ ਨੂੰ ਜਜ਼ਬ ਕਰਨ ਵੇਲੇ ਸੁਝਾਅ ਬਦਲੋ।
(ਬੀ) ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਓ ਕਿ ਸਾਰੇ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਯੰਤਰ ਸਾਫ਼ ਹਨ, ਨਹੀਂ ਤਾਂ ਇਹ ਪਰਖ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਤ ਕਰੇਗਾ।
8.2ਸ਼ਹਿਦ ਦਾ ਨਮੂਨਾ
----- 2g±0.05g ਸ਼ਹਿਦ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ 50ml ਪੋਲੀਸਟੀਰੀਨ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚ ਵਜ਼ਨ ਦਿਓ,
-----ਇਸ ਨੂੰ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਨਾਲ ਮਿਲਾਉਣ ਲਈ 2ml 0.2 M ਹਾਈਡ੍ਰੋਕਲੋਰਿਕ ਐਸਿਡ ਘੋਲ (ਸੂਲਿਊਸ਼ਨ 1), ਵੋਰਟੈਕਸ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ, ਫਿਰ 8ml ਮਿਥਾਈਲੀਨ ਕਲੋਰਾਈਡ ਪਾਓ, ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਘੁਲਣ ਲਈ 5 ਮਿੰਟ ਲਈ ਸ਼ੇਕਰ ਨਾਲ ਹਿਲਾਓ;
-----10 ਮਿੰਟ ਲਈ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ, ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਘੱਟੋ-ਘੱਟ 3000 ਗ੍ਰਾਮ (20-25℃);
-----ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟ ਪੜਾਅ ਨੂੰ ਹਟਾਓ, 2 ਮਿਲੀਲੀਟਰ ਸਬਸਟਰੇਟ ਆਰਗੈਨਿਕ ਘੋਲ ਨੂੰ 10 ਮਿਲੀਲੀਟਰ ਗਲਾਸ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚ ਲੈ ਜਾਓ। ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਵਹਾਅ (50-60℃) ਦੇ ਪਾਣੀ ਦੇ ਇਸ਼ਨਾਨ ਹੇਠ ਸਬਸਟੇਟ ਨੂੰ ਸੁਕਾਓ।
----- 1 ml n-hexane, 30s ਲਈ vortex ਸ਼ਾਮਿਲ ਕਰੋ, ਫਿਰ 1ml ਐਕਸਟਰੈਕਸ਼ਨ ਹੱਲ (ਸੋਲਿਊਸ਼ਨ 3), 1 ਮਿੰਟ ਲਈ ਫਿਰ ਤੋਂ ਵੌਰਟੈਕਸ ਜੋੜੋ।5 ਮਿੰਟ ਲਈ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ, ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਘੱਟੋ-ਘੱਟ 3000 ਗ੍ਰਾਮ (20-25℃);
-----ਸਪਰਨੇਟੈਂਟ ਪੜਾਅ ਨੂੰ ਹਟਾਓ, ਪਰਖ ਲਈ 50 ਮਿ.ਲੀ.
9. ਪਰਖ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ
9.1 ਜਾਂਚ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਨੋਟਿਸ
9.1.1 ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਓ ਕਿ ਸਾਰੇ ਰੀਐਜੈਂਟ ਅਤੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਵੇਲ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ (20-25℃) 'ਤੇ ਹਨ।
9.1.2 ਵਰਤਣ ਤੋਂ ਤੁਰੰਤ ਬਾਅਦ ਬਾਕੀ ਸਾਰੇ ਰੀਐਜੈਂਟਾਂ ਨੂੰ 2-8℃ 'ਤੇ ਵਾਪਸ ਕਰੋ।
9.1.3 ਮਾਈਕ੍ਰੋਵੈੱਲਾਂ ਨੂੰ ਸਹੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਧੋਣਾ ਪਰਖ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਕਦਮ ਹੈ;ਇਹ ELISA ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਦੀ ਦੁਹਰਾਉਣ ਲਈ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਕਾਰਕ ਹੈ।
9.1.4 ਪ੍ਰਕਾਸ਼ ਤੋਂ ਬਚੋ ਅਤੇ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਹੋਣ ਦੇ ਦੌਰਾਨ ਮਾਈਕ੍ਰੋਵੇਲਾਂ ਨੂੰ ਢੱਕੋ।
9.2 ਜਾਂਚ ਦੇ ਪੜਾਅ
9.2.1 ਸਾਰੇ ਰੀਐਜੈਂਟਸ ਨੂੰ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ (20-25℃) 'ਤੇ 30 ਮਿੰਟ ਤੋਂ ਵੱਧ ਸਮੇਂ ਲਈ ਬਾਹਰ ਕੱਢੋ, ਵਰਤੋਂ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਇਕਸਾਰ ਬਣਾਓ।
9.2.2 ਲੋੜੀਂਦੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਵੈੱਲਾਂ ਨੂੰ ਬਾਹਰ ਕੱਢੋ ਅਤੇ ਬਾਕੀ ਨੂੰ ਤੁਰੰਤ 2-8℃ 'ਤੇ ਜ਼ਿਪ-ਲਾਕ ਬੈਗ ਵਿੱਚ ਵਾਪਸ ਕਰੋ।
9.2.3 ਪਤਲੇ ਧੋਣ ਵਾਲੇ ਘੋਲ ਨੂੰ ਵਰਤਣ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਮੁੜ ਗਰਮ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।
9.2.4ਗਿਣਤੀ:ਹਰੇਕ ਮਾਈਕ੍ਰੋਵੈੱਲ ਸਥਿਤੀ ਨੂੰ ਸੰਖਿਆ ਕਰੋ ਅਤੇ ਸਾਰੇ ਮਿਆਰ ਅਤੇ ਨਮੂਨੇ ਡੁਪਲੀਕੇਟ ਵਿੱਚ ਚਲਾਏ ਜਾਣੇ ਚਾਹੀਦੇ ਹਨ।ਮਾਪਦੰਡਾਂ ਅਤੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੀਆਂ ਸਥਿਤੀਆਂ ਨੂੰ ਰਿਕਾਰਡ ਕਰੋ।
9.2.5ਮਿਆਰੀ ਹੱਲ/ਨਮੂਨਾ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ:50 µl ਮਿਆਰੀ ਘੋਲ ਜਾਂ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ ਸੰਬੰਧਿਤ ਖੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ।50µl ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਘੋਲ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ।ਪਲੇਟ ਨੂੰ ਹੱਥੀਂ ਹਿਲਾ ਕੇ ਹੌਲੀ-ਹੌਲੀ ਮਿਲਾਓ ਅਤੇ ਢੱਕਣ ਦੇ ਨਾਲ 25 ℃ 'ਤੇ 30 ਮਿੰਟ ਲਈ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕਰੋ।
9.2.6ਧੋਣਾ:ਢੱਕਣ ਨੂੰ ਹੌਲੀ-ਹੌਲੀ ਹਟਾਓ ਅਤੇ ਖੂਹਾਂ ਵਿੱਚੋਂ ਤਰਲ ਨੂੰ ਸ਼ੁੱਧ ਕਰੋ ਅਤੇ 4-5 ਵਾਰ 10 ਦੇ ਅੰਤਰਾਲ 'ਤੇ 250µl ਪਤਲੇ ਵਾਸ਼ ਘੋਲ (ਸੋਲਿਊਸ਼ਨ 2) ਨਾਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਵੈੱਲਾਂ ਨੂੰ ਕੁਰਲੀ ਕਰੋ।ਬਚੇ ਹੋਏ ਪਾਣੀ ਨੂੰ ਸੋਖਣ ਵਾਲੇ ਕਾਗਜ਼ ਨਾਲ ਜਜ਼ਬ ਕਰੋ (ਬਾਕੀ ਹਵਾ ਦੇ ਬੁਲਬੁਲੇ ਨੂੰ ਅਣਵਰਤੀ ਟਿਪ ਨਾਲ ਖਤਮ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ)।
9.2.8ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਸੰਜੋਗ:ਹਰੇਕ ਖੂਹ ਵਿੱਚ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਕੰਜੂਗੇਟ ਘੋਲ 100 ਮਿ.ਲੀ. ਪਾਓ, ਪਲੇਟ ਨੂੰ ਹੱਥੀਂ ਹਿਲਾ ਕੇ ਹੌਲੀ-ਹੌਲੀ ਮਿਲਾਓ ਅਤੇ ਢੱਕਣ ਦੇ ਨਾਲ 25 ℃ 'ਤੇ 30 ਮਿੰਟ ਲਈ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕਰੋ।ਧੋਣ ਦੇ ਕਦਮ ਨੂੰ ਦੁਬਾਰਾ ਦੁਹਰਾਓ.
9.2.8ਰੰਗ:ਹਰੇਕ ਖੂਹ ਵਿੱਚ 50µl ਘੋਲ A ਅਤੇ 50µl ਘੋਲ B ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ।ਪਲੇਟ ਨੂੰ ਹੱਥੀਂ ਹਿਲਾ ਕੇ ਹੌਲੀ-ਹੌਲੀ ਮਿਲਾਓ ਅਤੇ ਢੱਕਣ ਦੇ ਨਾਲ 25℃ 'ਤੇ 15 ਮਿੰਟ ਲਈ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕਰੋ (ਵੇਖੋ 12.8)।
9.2.9ਮਾਪ:ਹਰੇਕ ਖੂਹ ਵਿੱਚ 50µl ਸਟਾਪ ਘੋਲ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ।ਪਲੇਟ ਨੂੰ ਹੱਥੀਂ ਹਿਲਾ ਕੇ ਹੌਲੀ-ਹੌਲੀ ਮਿਕਸ ਕਰੋ ਅਤੇ ਏਅਰ ਬਲੈਂਕ ਦੇ ਵਿਰੁੱਧ 450nm 'ਤੇ ਸੋਜ਼ਸ਼ ਨੂੰ ਮਾਪੋ (ਇਹ 450/630nm ਦੀ ਦੋਹਰੀ ਤਰੰਗ-ਲੰਬਾਈ ਦੇ ਨਾਲ ਸੁਝਾਇਆ ਗਿਆ ਮਾਪ ਹੈ। ਸਟਾਪ ਘੋਲ ਜੋੜਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ 5 ਮਿੰਟ ਦੇ ਅੰਦਰ ਨਤੀਜਾ ਪੜ੍ਹੋ।) (ਅਸੀਂ ਨਜ਼ਰ ਦੁਆਰਾ ਵੀ ਮਾਪ ਸਕਦੇ ਹਾਂ। ELIASA ਸਾਧਨ ਦੇ ਸੰਖੇਪ ਵਿੱਚ ਸਟਾਪ ਹੱਲ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ)
ਨਤੀਜੇ
10.1 ਪ੍ਰਤੀਸ਼ਤ ਸਮਾਈ
ਮਾਪਦੰਡਾਂ ਅਤੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਲਈ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੇ ਸੋਖਣ ਮੁੱਲਾਂ ਦੇ ਔਸਤ ਮੁੱਲਾਂ ਨੂੰ ਪਹਿਲੇ ਸਟੈਂਡਰਡ (ਜ਼ੀਰੋ ਸਟੈਂਡਰਡ) ਦੇ ਸੋਖਣ ਮੁੱਲ ਨਾਲ ਵੰਡਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ 100% ਨਾਲ ਗੁਣਾ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਜ਼ੀਰੋ ਸਟੈਂਡਰਡ ਨੂੰ 100% ਦੇ ਬਰਾਬਰ ਬਣਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਸਮਾਈ ਮੁੱਲਾਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰਤੀਸ਼ਤ ਵਿੱਚ ਹਵਾਲਾ ਦਿੱਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।
ਸਮਾਈ (%) = B/B0 × 100%
ਬੀ ——ਸ਼ੋਸ਼ਣ ਮਿਆਰ (ਜਾਂ ਨਮੂਨਾ)
B0 ——ਸ਼ੋਸ਼ਣ ਜ਼ੀਰੋ ਸਟੈਂਡਰਡ
10.2 ਮਿਆਰੀ ਕਰਵ
ਇੱਕ ਸਟੈਂਡਰਡ ਕਰਵ ਖਿੱਚਣ ਲਈ: y-ਧੁਰੇ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਮਾਨਕਾਂ ਦੇ ਸੋਖਣ ਮੁੱਲ ਨੂੰ x-ਧੁਰੇ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਫਲੂਕੁਇਨ ਸਟੈਂਡਰਡ ਹੱਲ (ppb) ਦੀ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਦਾ ਅਰਧ ਲਘੂਗਣਕ ਲਓ।
--- ਦਫਲੂਕੁਇਨਹਰੇਕ ਨਮੂਨੇ (ppb) ਦੀ ਇਕਾਗਰਤਾ, ਜਿਸ ਨੂੰ ਕੈਲੀਬ੍ਰੇਸ਼ਨ ਕਰਵ ਤੋਂ ਪੜ੍ਹਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਨੂੰ ਹਰੇਕ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰੀ ਪਤਲੇ ਗੁਣਕ ਦੁਆਰਾ ਗੁਣਾ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਅਸਲ ਇਕਾਗਰਤਾ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।
ELISA ਕਿੱਟਾਂ ਦੇ ਡੇਟਾ ਨੂੰ ਘਟਾਉਣ ਲਈ, ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਸਾਫਟਵੇਅਰ ਵਿਕਸਿਤ ਕੀਤੇ ਗਏ ਹਨ, ਜੋ ਬੇਨਤੀ ਕਰਨ 'ਤੇ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕੀਤੇ ਜਾ ਸਕਦੇ ਹਨ।
11. ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ, ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧਤਾ
ਟੈਸਟ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ:0.3ppb
ਸ਼ਹਿਦ ਦਾ ਨਮੂਨਾ ਪਤਲਾ ਕਾਰਕ: 2
ਖੋਜ ਸੀਮਾ
ਸ਼ਹਿਦ ਦਾ ਨਮੂਨਾ--------- -1 ਪੀਪੀਬੀ
ਸ਼ੁੱਧਤਾ
ਸ਼ਹਿਦ ਦਾ ਨਮੂਨਾ ---------------------------------------------------------- 90±20 %
ਸ਼ੁੱਧਤਾ
ELISA ਕਿੱਟ ਦਾ ਪਰਿਵਰਤਨ ਗੁਣਾਂਕ 10% ਤੋਂ ਘੱਟ ਹੈ।
12. ਨੋਟਿਸ
12.1 ਮਾਪਦੰਡਾਂ ਅਤੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਲਈ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੇ ਸੋਖਣ ਮੁੱਲਾਂ ਦੇ ਔਸਤ ਮੁੱਲ ਘਟਾਏ ਜਾਣਗੇ ਜੇਕਰ ਰੀਐਜੈਂਟਸ ਅਤੇ ਨਮੂਨੇ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ (20-25℃) ਤੱਕ ਨਿਯੰਤ੍ਰਿਤ ਨਹੀਂ ਕੀਤੇ ਗਏ ਹਨ।
12.2 ਅਸਫਲ ਦੁਹਰਾਓ ਤੋਂ ਬਚਣ ਲਈ ਕਦਮਾਂ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਮਾਈਕ੍ਰੋਵੈੱਲਾਂ ਨੂੰ ਸੁੱਕਣ ਨਾ ਦਿਓ ਅਤੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਵੈੱਲ ਹੋਲਡਰ ਨੂੰ ਟੈਪ ਕਰਨ ਤੋਂ ਤੁਰੰਤ ਬਾਅਦ ਅਗਲਾ ਕਦਮ ਚਲਾਓ।
12.3.ਵਰਤਣ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਹਰੇਕ ਰੀਐਜੈਂਟ ਨੂੰ ਸਮਰੂਪ ਕਰੋ।
12.4.ਆਪਣੀ ਚਮੜੀ ਨੂੰ ਸਟਾਪ ਘੋਲ ਤੋਂ ਦੂਰ ਰੱਖੋ ਕਿਉਂਕਿ ਇਹ 2M ਐੱਚ2SO4ਦਾ ਹੱਲ.
12.5 ਪੁਰਾਣੀਆਂ ਕਿੱਟਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਨਾ ਕਰੋ।ਵੱਖ-ਵੱਖ ਬੈਚਾਂ ਦੇ ਰੀਐਜੈਂਟਸ ਦਾ ਆਦਾਨ-ਪ੍ਰਦਾਨ ਨਾ ਕਰੋ, ਕਿਉਂਕਿ ਇਹ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਨੂੰ ਘਟਾ ਦੇਵੇਗਾ।
12.6 ਸਟੋਰੇਜ ਸਥਿਤੀ:
ELISA ਕਿੱਟਾਂ ਨੂੰ 2-8℃ 'ਤੇ ਰੱਖੋ, ਫ੍ਰੀਜ਼ ਨਾ ਕਰੋ।ਸੀਲ ਰੈਸਟ ਮਾਈਕ੍ਰੋਵੇਲ ਪਲੇਟਾਂ ਸਾਰੇ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਹੋਣ ਦੌਰਾਨ ਸਿੱਧੀ ਧੁੱਪ ਤੋਂ ਬਚੋ।ਮਾਈਕ੍ਰੋਟਾਈਟਰ ਪਲੇਟਾਂ ਨੂੰ ਢੱਕਣ ਦੀ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।
12.7 ਖਰਾਬ ਹੋਣ ਵਾਲੇ ਰੀਐਜੈਂਟਸ ਲਈ ਸੰਕੇਤ:
ਸਬਸਟਰੇਟ ਘੋਲ ਨੂੰ ਛੱਡ ਦੇਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ ਜੇਕਰ ਇਹ ਰੰਗ ਬਦਲਦਾ ਹੈ।
ਰੀਐਜੈਂਟ ਖਰਾਬ ਹੋ ਸਕਦੇ ਹਨ ਜੇਕਰ ਜ਼ੀਰੋ ਸਟੈਂਡਰਡ ਦਾ ਸੋਖਣ ਮੁੱਲ (450/630nm) 0.5 (A450nm<0.5) ਤੋਂ ਘੱਟ ਹੈ।
12.8 ਹੱਲ A ਅਤੇ ਹੱਲ B ਨੂੰ ਜੋੜਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਰੰਗੀਨ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਨੂੰ 15 ਮਿੰਟ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ। ਅਤੇ ਜੇਕਰ ਰੰਗ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨ ਲਈ ਬਹੁਤ ਹਲਕਾ ਹੈ ਤਾਂ ਤੁਸੀਂ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਸਮੇਂ ਦੀ ਰੇਂਜ ਨੂੰ 20 ਮਿੰਟ ਤੋਂ ਵੱਧ ਤੱਕ ਵਧਾ ਸਕਦੇ ਹੋ।ਕਦੇ ਵੀ 25 ਮਿੰਟ ਤੋਂ ਵੱਧ ਨਾ ਕਰੋ, ਇਸਦੇ ਉਲਟ, ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਸਮੇਂ ਨੂੰ ਸਹੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਛੋਟਾ ਕਰੋ।
12.9 ਅਨੁਕੂਲ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦਾ ਤਾਪਮਾਨ 25℃ ਹੈ।ਵੱਧ ਜਾਂ ਘੱਟ ਤਾਪਮਾਨ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਅਤੇ ਸੋਖਣ ਮੁੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਤਬਦੀਲੀਆਂ ਵੱਲ ਲੈ ਜਾਵੇਗਾ।
13. ਸਟੋਰੇਜ
ਸਟੋਰੇਜ਼ ਸਥਿਤੀ: 2-8℃.
ਸਟੋਰੇਜ਼ ਦੀ ਮਿਆਦ: 12 ਮਹੀਨੇ.