ಉತ್ಪನ್ನ

1. ಹಿನ್ನೆಲೆ

ಟೈಲೋಸಿನ್ಮ್ಯಾಕ್ರೋಲೈಡ್ ಪ್ರತಿಜೀವಕವಾಗಿದೆ, ಇದನ್ನು ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಆಂಟಿಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಲ್ ಮತ್ತು ಆಂಟಿಮೈಕೋಪ್ಲಾಸ್ಮಾವಾಗಿ ಅನ್ವಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಕಟ್ಟುನಿಟ್ಟಾದ MRL ಗಳನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸಲಾಗಿದೆ ಏಕೆಂದರೆ ಈ ಔಷಧವು ಕೆಲವು ಗುಂಪುಗಳಲ್ಲಿ ಗಂಭೀರ ಅಡ್ಡ ಪರಿಣಾಮಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು.

ಈ ಕಿಟ್ ELISA ತಂತ್ರಜ್ಞಾನವನ್ನು ಆಧರಿಸಿದ ಹೊಸ ಉತ್ಪನ್ನವಾಗಿದೆ, ಇದು ಸಾಮಾನ್ಯ ವಾದ್ಯಗಳ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ವೇಗ, ಸುಲಭ, ನಿಖರ ಮತ್ತು ಸೂಕ್ಷ್ಮವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಒಂದು ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯಲ್ಲಿ ಕೇವಲ 1.5 ಗಂಟೆಗಳ ಅಗತ್ಯವಿದೆ, ಇದು ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯ ದೋಷ ಮತ್ತು ಕೆಲಸದ ತೀವ್ರತೆಯನ್ನು ಗಣನೀಯವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ.

2. ಪರೀಕ್ಷಾ ತತ್ವ

ಈ ಕಿಟ್ ಪರೋಕ್ಷ-ಸ್ಪರ್ಧಾತ್ಮಕ ELISA ತಂತ್ರಜ್ಞಾನವನ್ನು ಆಧರಿಸಿದೆ.ಮೈಕ್ರೊಟೈಟರ್ ಬಾವಿಗಳನ್ನು ಜೋಡಿಸುವ ಪ್ರತಿಜನಕದೊಂದಿಗೆ ಲೇಪಿಸಲಾಗಿದೆ.ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿರುವ ಟೈಲೋಸಿನ್ ಶೇಷವು ಪ್ರತಿಕಾಯಕ್ಕಾಗಿ ಮೈಕ್ರೊಟೈಟರ್ ಪ್ಲೇಟ್‌ನಲ್ಲಿ ಲೇಪಿತವಾದ ಪ್ರತಿಜನಕದೊಂದಿಗೆ ಸ್ಪರ್ಧಿಸುತ್ತದೆ.ಆಂಟಿ-ಆಂಟಿಬಾಡಿ ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಿದ ಕಿಣ್ವವನ್ನು ಸೇರಿಸಿದ ನಂತರ, ಬಣ್ಣವನ್ನು ತೋರಿಸಲು TMB ತಲಾಧಾರವನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಮಾದರಿಯ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯು ಅದರಲ್ಲಿರುವ ಟೈಲೋಸಿನ್‌ಗೆ ಋಣಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ, ಸ್ಟ್ಯಾಂಡರ್ಡ್ ಕರ್ವ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದ ನಂತರ, ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವ ಅಂಶದಿಂದ ಗುಣಿಸಿದಾಗ, ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಟೈಲೋಸಿನ್ ಶೇಷ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಲೆಕ್ಕಹಾಕಬಹುದು.

3. ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್‌ಗಳು

ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಅಂಗಾಂಶ (ಕೋಳಿ, ಹಂದಿ, ಬಾತುಕೋಳಿ) ಮತ್ತು ಹಾಲು, ಜೇನುತುಪ್ಪ, ಮೊಟ್ಟೆ, ಇತ್ಯಾದಿಗಳಲ್ಲಿನ ಟೈಲೋಸಿನ್ ಅವಶೇಷಗಳ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ಮತ್ತು ಗುಣಾತ್ಮಕ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯಲ್ಲಿ ಈ ಕಿಟ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಬಹುದು.

4. ಅಡ್ಡ-ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳು

ಟೈಲೋಸಿನ್ ……………………………………………… 100%

ಟಿಲ್ಮಿಕೋಸಿನ್ ………………………………………… 2%

5. ಅಗತ್ಯವಿರುವ ವಸ್ತುಗಳು

5.1 ಸಲಕರಣೆಗಳು:

----ಮೈಕ್ರೋಟೈಟರ್ ಪ್ಲೇಟ್ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಫೋಟೋಮೀಟರ್ (450nm/630nm)

---- ರೋಟರಿ ಬಾಷ್ಪೀಕರಣ ಅಥವಾ ಸಾರಜನಕ ಒಣಗಿಸುವ ಉಪಕರಣಗಳು

----ಹೋಮೊಜೆನೈಸರ್

----ಶೇಕರ್

----ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ

---- ವಿಶ್ಲೇಷಣಾತ್ಮಕ ಸಮತೋಲನ (ಇಂಡಕ್ಟನ್ಸ್: 0.01g)

---- ಪದವಿ ಪಡೆದ ಪೈಪೆಟ್: 10 ಮಿಲಿ

----ರಬ್ಬರ್ ಪೈಪೆಟ್ ಬಲ್ಬ್

----ವಾಲ್ಯೂಮೆಟ್ರಿಕ್ ಫ್ಲಾಸ್ಕ್: 10 ಮಿಲಿ

----ಪಾಲಿಸ್ಟೈರೀನ್ ಸೆಂಟ್ರಿಫ್ಯೂಜ್ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳು: 50ml

----ಮೈಕ್ರೋಪಿಪೆಟ್‌ಗಳು: 20-200ml, 100-1000ml

250 ಮಿಲಿ - ಮಲ್ಟಿಪಿಪೆಟ್

5.2 ಕಾರಕಗಳು:

----ಸೋಡಿಯಂ ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸೈಡ್ (NaOH, AR)

----ಸೋಡಿಯಂ ಬೈಕಾರ್ಬನೇಟ್ (NaHCO_3,AR)

---- ಸೋಡಿಯಂ ಕಾರ್ಬೋನೇಟ್ (NaCO₃, AR)

----ಟ್ರೈಕ್ಲೋರೋಅಸೆಟಿಕ್ ಆಮ್ಲ (AR)

---- ಅಸಿಟೋನೈಟ್ರೈಲ್ (AR)

----ಈಥೈಲ್ ಅಸಿಟೇಟ್ (AR)

┅┅ಎನ್-ಹೆಕ್ಸೇನ್ (AR)

----ಡಿಯೋನೈಸ್ಡ್ ನೀರು

6. ಕಿಟ್ ಘಟಕಗಳು

l ಪ್ರತಿಜನಕದೊಂದಿಗೆ ಲೇಪಿತವಾದ 96 ಬಾವಿಗಳೊಂದಿಗೆ ಮೈಕ್ರೊಟೈಟರ್ ಪ್ಲೇಟ್

l ಪ್ರಮಾಣಿತ ಪರಿಹಾರಗಳು (5 ಬಾಟಲಿಗಳು, 1 ಮಿಲಿ / ಬಾಟಲ್)

0ppb, 0.5ppb, 1.5ppb, 4.5ppb, 13.5ppb

l ಸ್ಪೈಕಿಂಗ್ ಪ್ರಮಾಣಿತ ನಿಯಂತ್ರಣ: (1ml/ಬಾಟಲ್)1ppm

l ಕಿಣ್ವ ಸಂಯೋಜಕ 1ml …………………………… ಕೆಂಪು ಕ್ಯಾಪ್

l ಪ್ರತಿಕಾಯ ದ್ರಾವಣ 7ml………………………… ಹಸಿರು ಕ್ಯಾಪ್

l ಪರಿಹಾರ A 7ml…………………………………… ಬಿಳಿ ಕ್ಯಾಪ್

l ಪರಿಹಾರ B 7ml.............................................. ಕೆಂಪು ಕ್ಯಾಪ್

l ಸ್ಟಾಪ್ ಪರಿಹಾರ 7ml.………………………………………… ಹಳದಿ ಕ್ಯಾಪ್

l 20 × ಕೇಂದ್ರೀಕೃತ ತೊಳೆಯುವ ಪರಿಹಾರ 40 ಮಿಲಿ

……………………………………… ಪಾರದರ್ಶಕ ಕ್ಯಾಪ್

l 4× ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಿದ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ ಪರಿಹಾರ 50 ಮಿಲಿ

…………………………………………………….ನೀಲಿ ಕ್ಯಾಪ್

7. ಕಾರಕಗಳ ತಯಾರಿ:

ಪರಿಹಾರ 1:0.1mol/L NaOH ಪರಿಹಾರ

0.4g NaOH ನಿಂದ 100ml ಡೀಯೋನೈಸ್ಡ್ ನೀರಿಗೆ ತೂಕ ಮತ್ತು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ.

ಪರಿಹಾರ 2: 1mol/L NaOH ಪರಿಹಾರ

4g NaOH ನಿಂದ 100ml ಡೀಯೋನೈಸ್ಡ್ ನೀರನ್ನು ತೂಕ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ.

ಪರಿಹಾರ 3: ಕಾರ್ಬೋನೇಟ್ ಬಫರ್ ಉಪ್ಪು

ಪರಿಹಾರ1: 0.2M PB

ನಾ ನ 51.6ಗ್ರಾಂ ಕರಗಿಸಿ₂HPO₄·12H₂O, NaH ನ 8.7g₂PO₄·2H₂O ಡೀಯೋನೈಸ್ಡ್ ನೀರಿನಿಂದ ಮತ್ತು 1000ml ಗೆ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿ.

ಪರಿಹಾರ2: ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ ಪರಿಹಾರ

1:1 ರ ಪರಿಮಾಣದ ಅನುಪಾತದಲ್ಲಿ 2×ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಿದ ಹೊರತೆಗೆಯುವ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಡಿಯೋನೈಸ್ಡ್ ನೀರಿನಿಂದ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿಉದಾ 10ml ಆಫ್ 2×ಎಕ್ಟ್ರಾಕ್ಷನ್ ಪರಿಹಾರ + 10ml ಆಫ್ ಡಿಯೋನೈಸ್ಡ್ ವಾಟರ್), ಇದನ್ನು ಮಾದರಿ ಹೊರತೆಗೆಯಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ,ಈ ಪರಿಹಾರವನ್ನು 1 ತಿಂಗಳವರೆಗೆ 4 ಡಿಗ್ರಿಗಳಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಬಹುದು.

ಪರಿಹಾರ3: ಪರಿಹಾರವನ್ನು ತೊಳೆಯಿರಿ

1:19 ರ ಪರಿಮಾಣದ ಅನುಪಾತದಲ್ಲಿ 20× ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಿದ ತೊಳೆಯುವ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಡಿಯೋನೈಸ್ಡ್ ನೀರಿನಿಂದ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿಉದಾ 5ml 20×ವಾಶ್ ದ್ರಾವಣ + 95ml ಡಿಯೋನೈಸ್ಡ್ ನೀರು), ಇದನ್ನು ಫಲಕಗಳನ್ನು ತೊಳೆಯಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಈ ದ್ರಾವಣವನ್ನು 4 ಡಿಗ್ರಿ ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ 1 ತಿಂಗಳವರೆಗೆ ಸಂಗ್ರಹಿಸಬಹುದು.

8. ಮಾದರಿ ಸಿದ್ಧತೆಗಳು

8.1 ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯ ಮೊದಲು ಸೂಚನೆ ಮತ್ತು ಮುನ್ನೆಚ್ಚರಿಕೆಗಳು:

(ಎ) ಪ್ರಯೋಗದ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ದಯವಿಟ್ಟು ಒಂದು-ಆಫ್ ಸಲಹೆಗಳನ್ನು ಬಳಸಿ ಮತ್ತು ವಿಭಿನ್ನ ಕಾರಕವನ್ನು ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಾಗ ಸಲಹೆಗಳನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸಿ.

(ಬಿ) ಎಲ್ಲಾ ಉಪಕರಣಗಳು ಸ್ವಚ್ಛವಾಗಿವೆ ಎಂದು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಿ.

(ಸಿ) ಅಂಗಾಂಶ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಫ್ರೀಜ್‌ನಲ್ಲಿ ಇರಿಸಿ.

(ಡಿ) ತಯಾರಾದ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಒಮ್ಮೆಗೇ ಪರೀಕ್ಷೆಗೆ ಬಳಸಬೇಕು.

8.2 ಪ್ರಾಣಿ ಅಂಗಾಂಶ (ಕೋಳಿ, ಹಂದಿ, ಇತ್ಯಾದಿ)

---- ಮಾದರಿಯನ್ನು ಹೋಮೋಜೆನೈಜರ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಏಕರೂಪಗೊಳಿಸಿ;

----50ml ಪಾಲಿಸ್ಟೈರೀನ್ ಸೆಂಟ್ರಿಫ್ಯೂಜ್ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗೆ 2.0±0.05g ಹೋಮೋಜೆನೇಟ್ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಿ;0.2M PB ಯ 2ml ಸೇರಿಸಿ (ಪರಿಹಾರ1) ಕರಗಿಸಲು ಅಲ್ಲಾಡಿಸಿ, ತದನಂತರ 8ml ಈಥೈಲ್ ಅಸಿಟೇಟ್ ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಿ ಮತ್ತು 3 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ತೀವ್ರವಾಗಿ ಅಲ್ಲಾಡಿಸಿ;

----ಬೇರ್ಪಡಿಕೆಗಾಗಿ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ: 3000g / ಸುತ್ತುವರಿದ ತಾಪಮಾನ / 5ನಿಮಿ.

---- 4ml ಸೂಪರ್‌ನಾಟಂಟ್ ಸಾವಯವ ಹಂತವನ್ನು 10ml ಗಾಜಿನ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಿ, ಸಾರಜನಕ ಅನಿಲ ಸ್ಟ್ರೀಮ್ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ 50-60℃ ನೀರಿನ ಸ್ನಾನದೊಂದಿಗೆ ಒಣಗಿಸಿ;

----ಒಣ ಎಂಜಲನ್ನು 1ml n-ಹೆಕ್ಸೇನ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಕರಗಿಸಿ, ಕರಗಿಸಲು 30s ವರೆಗೆ ಸುಳಿ ಮಾಡಿ, ತದನಂತರ 1ml ಹೊರತೆಗೆಯುವ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ (ಪರಿಹಾರ2), 1ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ ಸುಳಿಗಾಳಿ.ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲು ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ: 3000g / ಸುತ್ತುವರಿದ ತಾಪಮಾನ / 5 ನಿಮಿಷ

----ಸೂಪರ್ನಾಟಂಟ್ ಎನ್-ಹೆಕ್ಸೇನ್ ಹಂತವನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಿ;ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಾಗಿ ತಲಾಧಾರದ ಜಲೀಯ ಹಂತದ 50μl ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಿ.

ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವ ಅಂಶ: 1

8.2 ಹಾಲು

----100μl ಕಚ್ಚಾ ಹಾಲಿನ ಮಾದರಿಯನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಿ, 900μl ಹೊರತೆಗೆಯುವ ದ್ರಾವಣದೊಂದಿಗೆ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ (ಪರಿಹಾರ2), ಮತ್ತು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ.

----ತಯಾರಿಸಿದ ಪರಿಹಾರದ 50μl ಅನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಾಗಿ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಿ.

ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವ ಅಂಶ: 10

9. ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆ

9.1 ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಮೊದಲು ಗಮನಿಸಿ

9.1.1ಎಲ್ಲಾ ಕಾರಕಗಳು ಮತ್ತು ಮೈಕ್ರೊವೆಲ್‌ಗಳು ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ (20-25℃) ಇರುವುದನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಿ.

9.1.2ಉಳಿದ ಎಲ್ಲಾ ಕಾರಕಗಳನ್ನು 2-8 ಕ್ಕೆ ಹಿಂತಿರುಗಿ℃ಬಳಸಿದ ತಕ್ಷಣ.

9.1.3ಮೈಕ್ರೋವೆಲ್‌ಗಳನ್ನು ಸರಿಯಾಗಿ ತೊಳೆಯುವುದು ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ಪ್ರಮುಖ ಹಂತವಾಗಿದೆ;ಇದು ELISA ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಪುನರುತ್ಪಾದನೆಗೆ ಪ್ರಮುಖ ಅಂಶವಾಗಿದೆ.

9.1.4 ಎಬೆಳಕನ್ನು ಅನೂರ್ಜಿತಗೊಳಿಸಿ ಮತ್ತು ಕಾವುಕೊಡುವ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಮೈಕ್ರೊವೆಲ್‌ಗಳನ್ನು ಮುಚ್ಚಿ.

9.2 ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ಹಂತಗಳು

9.2.1 ಎಲ್ಲಾ ಕಾರಕಗಳನ್ನು ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ (20-25℃) 30 ನಿಮಿಷಗಳಿಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ಕಾಲ ಹೊರತೆಗೆಯಿರಿ, ಬಳಸುವ ಮೊದಲು ನಿಧಾನವಾಗಿ ಅಲ್ಲಾಡಿಸಿ.

9.2.2 ಅಗತ್ಯವಿರುವ ಮೈಕ್ರೋವೆಲ್‌ಗಳನ್ನು ಪಡೆಯಿರಿ ಮತ್ತು ಉಳಿದವುಗಳನ್ನು 2-8℃ ನಲ್ಲಿ ಜಿಪ್-ಲಾಕ್ ಬ್ಯಾಗ್‌ಗೆ ತಕ್ಷಣವೇ ಹಿಂತಿರುಗಿಸಿ.

9.2.3 ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿದ ತೊಳೆಯುವ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಬಳಕೆಗೆ ಮೊದಲು ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ ಪುನರುಜ್ಜೀವನಗೊಳಿಸಬೇಕು.

9.2.4ಸಂಖ್ಯೆ:ಪ್ರತಿ ಮೈಕ್ರೊವೆಲ್ ಸ್ಥಾನಗಳನ್ನು ಮತ್ತು ಎಲ್ಲಾ ಮಾನದಂಡಗಳು ಮತ್ತು ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ನಕಲಿನಲ್ಲಿ ರನ್ ಮಾಡಬೇಕು.ಮಾನದಂಡಗಳು ಮತ್ತು ಮಾದರಿಗಳ ಸ್ಥಾನಗಳನ್ನು ರೆಕಾರ್ಡ್ ಮಾಡಿ.

9.2.5Aಡಿಡಿ ಪ್ರಮಾಣಿತ ಪರಿಹಾರ/ಮಾದರಿ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕಾಯ ಪರಿಹಾರ: 50µl ಪ್ರಮಾಣಿತ ಪರಿಹಾರವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ (((ಕಿಟ್ ಒದಗಿಸಲಾಗಿದೆ)) ಅಥವಾ ಅನುಗುಣವಾದ ಬಾವಿಗಳಿಗೆ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಸಿದ್ಧಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ.50µl ಪ್ರತಿಕಾಯ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ (ಕಿಟ್ ಒದಗಿಸಲಾಗಿದೆ)ಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ಹಸ್ತಚಾಲಿತವಾಗಿ ಅಲುಗಾಡಿಸುವುದರ ಮೂಲಕ ನಿಧಾನವಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಕವರ್ನೊಂದಿಗೆ 37 ° ನಲ್ಲಿ 30 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಕಾವುಕೊಡಿ.

9.2.6ತೊಳೆಯಿರಿ: ಕವರ್ ಅನ್ನು ನಿಧಾನವಾಗಿ ತೆಗೆದುಹಾಕಿ ಮತ್ತು ಬಾವಿಗಳಿಂದ ದ್ರವವನ್ನು ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿ ಮತ್ತು ಮೈಕ್ರೋವೆಲ್‌ಗಳನ್ನು 250µl ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿದ ತೊಳೆಯುವ ದ್ರಾವಣದಿಂದ ತೊಳೆಯಿರಿ (ಪರಿಹಾರ3) 10 ಸೆಕೆಂಡುಗಳ ಮಧ್ಯಂತರದಲ್ಲಿ 4-5 ಬಾರಿ.ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವ ಕಾಗದದೊಂದಿಗೆ ಉಳಿದಿರುವ ನೀರನ್ನು ಹೀರಿಕೊಳ್ಳಿ (ಉಳಿದ ಗಾಳಿಯ ಗುಳ್ಳೆಯನ್ನು ಬಳಕೆಯಾಗದ ತುದಿಯಿಂದ ಹೊರಹಾಕಬಹುದು).

9.2.7ಕಿಣ್ವ ಸಂಯೋಜಕವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ: 100ml ಕಿಣ್ವ ಸಂಯೋಜಕ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ(ಕಿಟ್ ಒದಗಿಸಲಾಗಿದೆ) ಪ್ರತಿ ಬಾವಿಗೆ, ನಿಧಾನವಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು 37 ಡಿಗ್ರಿ ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ 30 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಕವರ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಕಾವುಕೊಡಿ.ಮತ್ತೆ ತೊಳೆಯುವ ಹಂತವನ್ನು ಪುನರಾವರ್ತಿಸಿ.

9.2.8ಬಣ್ಣ: 50µl ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ A(ಕಿಟ್ ಒದಗಿಸಲಾಗಿದೆ) ಮತ್ತು 50µl ದ್ರಾವಣ B(ಕಿಟ್ ಒದಗಿಸಲಾಗಿದೆ) ಪ್ರತಿ ಬಾವಿಗೆ.ನಿಧಾನವಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಕವರ್‌ನೊಂದಿಗೆ 37 ಡಿಗ್ರಿ ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ 15 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಕಾವುಕೊಡಿ.

9.2.9ಅಳತೆ: ಸ್ಟಾಪ್ ಪರಿಹಾರದ 50µl ಸೇರಿಸಿ (ಕಿಟ್ ಒದಗಿಸಲಾಗಿದೆ) ಪ್ರತಿ ಬಾವಿಗೆ.ನಿಧಾನವಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು 450nm ನಲ್ಲಿ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯನ್ನು ಅಳೆಯಿರಿ (ಇದು 450/630nm ನ ಡ್ಯುಯಲ್-ವೇವ್‌ಲೆಂಗ್ತ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಅಳತೆ ಮಾಡಲು ಸೂಚಿಸಲಾಗಿದೆ. ಸ್ಟಾಪ್ ಪರಿಹಾರವನ್ನು ಸೇರಿಸಿದ ನಂತರ 5 ನಿಮಿಷಗಳ ಒಳಗೆ ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನು ಓದಿ).

10. ಫಲಿತಾಂಶಗಳು

10.1 ಶೇಕಡಾವಾರು ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆ

ಮಾನದಂಡಗಳು ಮತ್ತು ಮಾದರಿಗಳಿಗೆ ಪಡೆದ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವ ಮೌಲ್ಯಗಳ ಸರಾಸರಿ ಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು ಮೊದಲ ಮಾನದಂಡದ (ಶೂನ್ಯ ಪ್ರಮಾಣಿತ) ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವ ಮೌಲ್ಯದಿಂದ ಭಾಗಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು 100% ರಿಂದ ಗುಣಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಶೂನ್ಯ ಮಾನದಂಡವನ್ನು 100% ಗೆ ಸಮನಾಗಿರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವ ಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು ಶೇಕಡಾವಾರುಗಳಲ್ಲಿ ಉಲ್ಲೇಖಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.

B

ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆ (%) = —— × 100%

B0

ಬಿ —-ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವ ಮಾನದಂಡ (ಅಥವಾ ಮಾದರಿ)

B0 ——ಹೀರುವಿಕೆ ಶೂನ್ಯ ಪ್ರಮಾಣಕ

10.2 ಸ್ಟ್ಯಾಂಡರ್ಡ್ ಕರ್ವ್

----ಪ್ರಮಾಣಿತ ವಕ್ರರೇಖೆಯನ್ನು ಸೆಳೆಯಲು: y-ಆಕ್ಸಿಸ್ ಆಗಿ ಮಾನದಂಡಗಳ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವ ಮೌಲ್ಯವನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಿ, ಟೈಲೋಸಿನ್ ಮಾನದಂಡಗಳ ದ್ರಾವಣದ (ppb) ಸಾಂದ್ರತೆಯ ಅರೆ ಲಾಗರಿಥಮಿಕ್ ಅನ್ನು x-ಆಕ್ಸಿಸ್ ಆಗಿ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಿ.

----ಮಾಪನಾಂಕ ನಿರ್ಣಯದ ರೇಖೆಯಿಂದ ಓದಬಹುದಾದ ಪ್ರತಿ ಮಾದರಿಯ (ppb) ಟೈಲೋಸಿನ್ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಅನುಸರಿಸಿದ ಪ್ರತಿ ಮಾದರಿಯ ಅನುಗುಣವಾದ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವ ಅಂಶದಿಂದ ಗುಣಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಮಾದರಿಯ ನಿಜವಾದ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಪಡೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ.

ದಯವಿಟ್ಟು ಗಮನಿಸಿ:

ಡೇಟಾ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಾಗಿ ವಿಶೇಷ ಸಾಫ್ಟ್‌ವೇರ್ ಅನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ, ಅದನ್ನು ವಿನಂತಿಯ ಮೇರೆಗೆ ಒದಗಿಸಬಹುದು.

11. ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆ, ನಿಖರತೆ ಮತ್ತು ನಿಖರತೆ

ಪರೀಕ್ಷಾ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆ:1.5ppb

ಪತ್ತೆ ಮಿತಿ:

ಪ್ರಾಣಿ ಅಂಗಾಂಶ …………………………………………………… 1.5ppb ಹಾಲು …………………………………………………………… 15 ಪಿಪಿಬಿ ನಿಖರತೆ:

ಪ್ರಾಣಿ ಅಂಗಾಂಶ ………………………………………… 80 ± 15%

ಹಾಲು ……………………………………………… 80 ± 10%

ನಿಖರತೆ:

ELISA ಕಿಟ್‌ನ ಬದಲಾವಣೆಯ ಗುಣಾಂಕವು 10% ಕ್ಕಿಂತ ಕಡಿಮೆಯಿದೆ.

12. ಗಮನಿಸಿ

12.1 ಕಾರಕಗಳು ಮತ್ತು ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶಕ್ಕೆ (20-25℃) ನಿಯಂತ್ರಿಸದಿದ್ದರೆ ಮಾನದಂಡಗಳು ಮತ್ತು ಮಾದರಿಗಳಿಗೆ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವ ಮೌಲ್ಯಗಳ ಸರಾಸರಿ ಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು ಕಡಿಮೆಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.

12.2 ವಿಫಲವಾದ ಪುನರುತ್ಪಾದನೆಯನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಲು ಮತ್ತು ಮೈಕ್ರೋವೆಲ್ ಹೋಲ್ಡರ್ ಅನ್ನು ಟ್ಯಾಪ್ ಮಾಡಿದ ತಕ್ಷಣ ಮುಂದಿನ ಹಂತವನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಲು ಮೈಕ್ರೋವೆಲ್‌ಗಳನ್ನು ಹಂತಗಳ ನಡುವೆ ಒಣಗಲು ಅನುಮತಿಸಬೇಡಿ.

12.3 ಬಳಕೆಗೆ ಮೊದಲು ಪ್ರತಿ ಕಾರಕವನ್ನು ನಿಧಾನವಾಗಿ ಅಲ್ಲಾಡಿಸಿ.

12.4 ನಿಮ್ಮ ಚರ್ಮವನ್ನು ಸ್ಟಾಪ್ ಪರಿಹಾರದಿಂದ ದೂರವಿಡಿ ಏಕೆಂದರೆ ಅದು 0.5MH ಆಗಿದೆ₂SO₄ಪರಿಹಾರ.

12.5 ಅವಧಿ ಮೀರಿದ ಕಿಟ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸಬೇಡಿ.ವಿಭಿನ್ನ ಬ್ಯಾಚ್‌ಗಳ ಕಾರಕಗಳನ್ನು ವಿನಿಮಯ ಮಾಡಿಕೊಳ್ಳಬೇಡಿ, ಇಲ್ಲದಿದ್ದರೆ ಅದು ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ.

12.6 ELISA ಕಿಟ್‌ಗಳನ್ನು 2-8℃ ನಲ್ಲಿ ಇರಿಸಿ, ಫ್ರೀಜ್ ಮಾಡಬೇಡಿ.ಉಳಿದ ಮೈಕ್ರೋವೆಲ್ ಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳನ್ನು ಮುಚ್ಚಿ, ಎಲ್ಲಾ ಕಾವುಗಳ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ನೇರ ಸೂರ್ಯನ ಬೆಳಕನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಿ.ಮೈಕ್ರೊಟೈಟರ್ ಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳನ್ನು ಕವರ್ ಮಾಡಲು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.

12.7 ಸಬ್ಸ್ಟ್ರೇಟ್ ದ್ರಾವಣವು ಬಣ್ಣಗಳನ್ನು ತಿರುಗಿಸಿದರೆ ಅದನ್ನು ತ್ಯಜಿಸಬೇಕು.ಶೂನ್ಯ ಮಾನದಂಡದ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವ ಮೌಲ್ಯವು (450/630nm) 0.5 (A450nm<0.5) ಗಿಂತ ಕಡಿಮೆಯಿದ್ದರೆ ಕಾರಕಗಳು ಕೆಟ್ಟದಾಗಿರಬಹುದು.

12.8 ದ್ರಾವಣ A ಮತ್ತು ಪರಿಹಾರ B ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಿದ ನಂತರ ಬಣ್ಣ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗೆ 15 ನಿಮಿಷಗಳು ಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ. ಮತ್ತು ಬಣ್ಣವು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ತುಂಬಾ ಹಗುರವಾಗಿದ್ದರೆ ನೀವು ಕಾವು ಸಮಯದ ವ್ಯಾಪ್ತಿಯನ್ನು 20 ನಿಮಿಷ ಅಥವಾ ಅದಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ವಿಸ್ತರಿಸಬಹುದು.30 ನಿಮಿಷಗಳನ್ನು ಮೀರಬಾರದು, ಇದಕ್ಕೆ ವಿರುದ್ಧವಾಗಿ, ಕಾವು ಸಮಯವನ್ನು ಸರಿಯಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಿ.

12.9 ಸೂಕ್ತ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ತಾಪಮಾನವು 37℃ ಆಗಿದೆ.ಹೆಚ್ಚಿನ ಅಥವಾ ಕಡಿಮೆ ತಾಪಮಾನವು ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆ ಮತ್ತು ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವ ಮೌಲ್ಯಗಳ ಬದಲಾವಣೆಗಳಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ.

13. ಸಂಗ್ರಹಣೆ

ಶೇಖರಣಾ ಸ್ಥಿತಿ: 2-8℃.

ಶೇಖರಣಾ ಅವಧಿ: 12 ತಿಂಗಳುಗಳು.